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選擇合適的克隆位點,并對載體進行線性化。盡量選擇無重復(fù)序列且載體克隆位點上下游20bp區(qū)域內(nèi)GC含量在40%-60%之間的位點進行克隆。載體線性化方式有限制性內(nèi)切酶酶切消化和反向PCR擴增。1)酶切制備線性化載體時,推薦使用雙酶切線性化,線性化wqn全5.1 制備線性化載體 一步克隆試劑盒 克隆系列