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| 品牌 | NobleRyder/諾博萊德 | 貨號 | BO6039 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機物的降解活性 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)試劑盒說明書
微量法 100T/96S
土壤脫氫酶試劑盒
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。
測定原理:
氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,TTC)在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),在波長 485nm 處有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 | BO6039-100T/96S | Storage |
試劑一:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑二:粉劑 | 20ml | 4℃ |
試劑三:甲醇 | (自備) | |
說明書 | 一份 | |
試劑一:粉劑×1 瓶,使用前加 10ml 試劑二溶解,4℃避光保存(盡量現(xiàn)配現(xiàn)用)。
自備儀器和用品:
篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過 30~50 目篩。
測定步驟和操作表:
空白管 | 測定管 | |
樣品(g) | 0.05 | |
試劑一(μl) | 100 | |
試劑二(μl) | 100 | |
充分混勻,37℃培養(yǎng) 24h | ||
試劑三(μl) | 900 | 900 | ||
振蕩 1h,8000g,25℃,離心 5min,取 200μl 上清于微量石英比色皿/96 孔板,測定 A485, △A=A 測定-A 空白管??瞻坠苤灰鲆还?。 | ||||
脫氫酶活力計算:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0211x - 0.0312;R2 = 0.9988;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y 為吸光值。 酶活單位定義:在 37℃時,每克土壤樣品每天催化產(chǎn)生 1μgTF 為一個酶活性單位。 sDHA(μg/ d /g 土樣)=(△A+0.0312)÷ 0.0211×V 反總÷W÷T= 47.39×(△A+0.0312)÷W V 反總:反應(yīng)總體積,1ml;T:培養(yǎng)時間,1d;W:樣品質(zhì)量,g
注意事項:
配制好的試劑一避光保存于 4℃,最好在一周內(nèi)使用,若出現(xiàn)紅色,則不能使用。
土壤脫氫酶試劑盒